ایجاد اشکال نوترکیب فتوپروتئین اکورین با میل اتصالی بالا به کلسیم

فوتوپروتئین اکورین جدا شده از ژله فیش اکوریا ویکتوریا، فوتوپروتئین حساس به کلسیم است که از اپوپروتئین اپواکورین و گروه پروستاتیک کوالنترازین تشکیل شده که دراثر اتصال با کلسیم نور نشر می کند. این پروتئین مونومری شامل 4 موتیف ef hand است که 3 دومین آن می تواند به کلسیم متصل شود. اکورین به طور گسترده ای به عنوان شناساگر داخل سلولی کلسیم عمل می کند علاوه براین، فوتوپروتئین ملکول گزارشگر ارزشمند است چراکه در حضور کلسیم قدرت شناسایی درسطح اتومول را دارد. از طرف دیگر نقش مهمی در آبشار انتقال پیام عصبی از جمله رهاسازی نوروترانسمیتر، فعال سازی آنزیم دارد. دراین جا، ما 2 موتاسیون نقطه ای k30t)و (n28d و دو موتاسیون ترکیبی [nnk (n26d, n28d, k30t)] و nhn (n26d, h27g, n28d)] را در ناحیه ef hand ? طراحی کردیم. موتاسیون ها در این ناحیه از طریق روش موتاسیون هدایت شده کوایک چنج انجام شد و جهت بررسی حساسیت به کلسیم، اپواکورین با دنباله هیستیدین در e.coli بیان شد و نتایج نشان داد دو تک موتاسیون k30t,n28d برخلاف دو موتاسیون ترکیبی n26e , h27g , n28e (nhn) و n26d , n28d k30t (nnk)حساسیت بالاتری به کلسیم دارد.